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微生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室依托山東大學(xué),實(shí)驗(yàn)室是作為世界銀行貸款重點(diǎn)學(xué)科發(fā)展項(xiàng)目的一個(gè)子項(xiàng)目,由世界銀行貸款120萬美元,國(guó)內(nèi)配套362萬元人民幣投資建設(shè)的。
1995年11月通過國(guó)家驗(yàn)收,并開始正式運(yùn)行和對(duì)外開放。生物反應(yīng)器工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室俞俊棠教授任學(xué)術(shù)委員會(huì)主任,山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院院長(zhǎng)曲音波教授任實(shí)驗(yàn)室主任。實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有工作人員28人,其中教授9人,副教授12人,講師4人,工程技術(shù)人員3人。
(來源:文章屋網(wǎng) )
一、常規(guī)安全操作制度
1、禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。參觀實(shí)驗(yàn)室等特殊情況須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入。
2、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)穿著專用的實(shí)驗(yàn)服,嚴(yán)禁穿便服進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,盡量減少出入實(shí)驗(yàn)室的次數(shù)。
3、接觸微生物或含有微生物的物品后,脫掉手套后和離開實(shí)驗(yàn)室前要洗手。
4、嚴(yán)禁在工作區(qū)進(jìn)行飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲(chǔ)存食物等一切與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的行為。
5、用移液器吸取液體,禁止口吸。
6、按照實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程操作,降低濺出和盡可能少的產(chǎn)生氣溶膠。
7、每天至少消毒一次工作臺(tái)面,活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)消毒。
8、培養(yǎng)基、組織、體液及其他具有潛在危險(xiǎn)性的廢棄物須放在防漏的容器中儲(chǔ)存、運(yùn)輸及消毒滅菌。所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前必須進(jìn)行滅活,如高壓滅活。
9、制定有效的防鼠防蟲措施。
二、特殊安全操作制度
l、進(jìn)行感染性實(shí)驗(yàn)時(shí),禁止他人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意后方可進(jìn)入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意后方可在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作。
2、可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作均應(yīng)在生物安全柜或其他物理抑制設(shè)備中進(jìn)行,并使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。
3、處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜或其他物理抑制設(shè)備中進(jìn)行,并使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。
4、當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行而必須采取外部操作時(shí),為防止感染性材料濺出或霧化危害,必須使用面部保護(hù)裝置(護(hù)目鏡、面罩、個(gè)體呼吸保護(hù)用品或其他防濺出保護(hù)設(shè)備)。
5、在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護(hù)服。離開實(shí)驗(yàn)室時(shí),防護(hù)服必須脫下并留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。不得穿著外出,更不能攜帶回家。用過的工作服應(yīng)先在實(shí)驗(yàn)室中消毒,然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。
6、當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的表面或設(shè)備時(shí)應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或?yàn)R出,宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實(shí)驗(yàn)室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。
7、實(shí)驗(yàn)室入口處必須貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志,注明危險(xiǎn)因子、生物安全級(jí)別、需要的免疫、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的特殊要求及離開實(shí)驗(yàn)室的程序。
8、工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種和檢測(cè)(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。
9、必要時(shí)收集從事危險(xiǎn)性工作人員等基本血清留底,并根據(jù)需要定期收集血清樣本,應(yīng)有檢測(cè)報(bào)告,如有問題及時(shí)處理。
10、將生物安全程序納入標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范或生物安全手冊(cè),由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人專門保管,工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前要閱讀規(guī)范并按照規(guī)范要求操作。
11、工作人員要接受有關(guān)潛在危險(xiǎn)知識(shí)的培訓(xùn),掌握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次微生物實(shí)驗(yàn)室組織的最新培訓(xùn)。
12、嚴(yán)格遵守下列規(guī)定,防止利器損傷:
①除特殊情況(腸道外注射和靜脈切開等)外,禁止在實(shí)驗(yàn)室使用針、注射器及其他利器。盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。
②盡可能應(yīng)用一次性注射器,用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽、從注射器取下,禁止用手直接操作。用過的針頭必須直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運(yùn)送到特定區(qū)域消毒,做好高壓消毒。
③盡可能使用無針注射器和其他安全裝置;
④禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃容器在丟棄之前必須消毒。
13、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒。
關(guān)鍵詞:菌種復(fù)蘇;傳代;保存
微生物實(shí)驗(yàn)是我國(guó)建筑醫(yī)藥研發(fā)及生產(chǎn)的重要環(huán)節(jié),是確保我國(guó)醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵基礎(chǔ)。根據(jù)藥典中的標(biāo)準(zhǔn),微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)于新引進(jìn)的培養(yǎng)基需要通過靈敏度測(cè)試后才能投入使用;另外,在對(duì)無菌實(shí)驗(yàn)成果進(jìn)行檢查時(shí)需要使用金黃色葡萄球菌作為對(duì)比參照,而在對(duì)日常灌裝環(huán)境質(zhì)量檢測(cè)時(shí)需要使用環(huán)境菌進(jìn)行輔助檢驗(yàn)。由此可見,菌種為微生物實(shí)驗(yàn)中非常關(guān)鍵的因素,所以必須要建立起一個(gè)科學(xué)、健全的微生物實(shí)驗(yàn)室菌種的復(fù)蘇、傳代及保存體系。
1 用具與設(shè)備
接種環(huán),接種針,酒精燈,電熱恒溫培養(yǎng)箱,生化培養(yǎng)箱,冰箱,滅菌柜,超凈臺(tái),液氮罐,超低溫冰箱,1.5mL凍存管,試管等。
2 菌種的復(fù)活
應(yīng)在環(huán)境潔凈度D級(jí)下的局部潔凈度不低于B級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行,其全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,防止微生物污染,制備F1,(接收到合適菌種準(zhǔn)備使用時(shí),應(yīng)根據(jù)菌種/細(xì)胞株的說明書制備復(fù)活的培養(yǎng)基對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株、細(xì)胞株進(jìn)行復(fù)活。清潔安瓶(可用75%乙醇)后,用砂輪在安瓶的上部1/3處劃線,用干燥的無菌紗布包裹安瓶,將安瓶打開。用一無菌吸管吸取0.5-0.8mL適量的液體培養(yǎng)基(生抱梭菌用液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基;大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、短小芽胞桿菌、銅綠假單胞菌和枯草芽抱桿菌用胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基;白色念珠菌、黑曲霉用沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基)滴加到安瓶中,輕輕旋轉(zhuǎn)安瓶并吹打,使凍干菌種和液體培養(yǎng)基充分混合并完全溶解,再將安瓶?jī)?nèi)的菌液轉(zhuǎn)移至相應(yīng)的培養(yǎng)基中,根據(jù)菌種類型將其放入適宜的培養(yǎng)條件[需氧菌培養(yǎng)溫度(30-35)℃,18-24h;真菌培養(yǎng)溫度(20-25)℃,3-5d下培養(yǎng),觀察培養(yǎng)基是否渾濁,渾濁說明菌種復(fù)活生長(zhǎng),此為F1,如不渾濁,需氧菌應(yīng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至5天以上,真菌應(yīng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至7d以上,仍不渾濁,按121℃,30min條件火菌處理,再對(duì)復(fù)活后的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株進(jìn)行純度和特性的確認(rèn)。
3 菌種的傳代
菌種是微生物實(shí)驗(yàn)中的重要輔助工具,所以其質(zhì)量非常重要,每一個(gè)菌種在使用前都需要進(jìn)過嚴(yán)格的測(cè)評(píng)才能投入實(shí)驗(yàn)中。微生物實(shí)驗(yàn)是一項(xiàng)對(duì)嚴(yán)謹(jǐn)性和精確性要求非常高的工作,所以對(duì)于試驗(yàn)中要用到的每一類菌種的復(fù)蘇、傳代和保存都有一套非常嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)及原則,已經(jīng)透過嚴(yán)格檢定、確定與相關(guān)條件相吻合的菌種才能執(zhí)行傳代步驟。另外,傳代工作流程在實(shí)際操作時(shí)也有非常嚴(yán)格的要求,傳代次數(shù)不宜過多,且要減少不必要的傳代工作,同時(shí)還要對(duì)傳代時(shí)的溫度進(jìn)行合理調(diào)控。
4 菌種的保藏
在菌種的復(fù)蘇及傳代工作完成后,實(shí)驗(yàn)室中的菌種管理工作體系已經(jīng)進(jìn)入最后一個(gè)環(huán)節(jié),這一環(huán)節(jié)同樣是保證菌種質(zhì)量及功效的重要步驟。而在實(shí)驗(yàn)室的當(dāng)中對(duì)菌種進(jìn)行保藏的方法有很多,下面筆者就對(duì)幾種實(shí)驗(yàn)室中常見的菌種保藏方法進(jìn)行簡(jiǎn)要闡述。
4.1 甘油冷凍管保藏法
甘油冷凍管保藏發(fā)是在實(shí)驗(yàn)室中一種非常常用的保藏手段,該方法的具體操作方法是使用無菌接種環(huán)對(duì)菌種表面的菌苔進(jìn)行刮取,然后利用接種環(huán)接觸試管的方式使細(xì)菌通過與試管壁的輕度摩擦向事先準(zhǔn)備好的放置于試管內(nèi)部的無菌蒸餾水中傳輸,或直接將菌放置于培養(yǎng)基當(dāng)中,同時(shí)還要對(duì)菌液的濃度進(jìn)行調(diào)節(jié),然后在調(diào)配完成后的菌懸液中添加體積相等、濃度標(biāo)準(zhǔn)是30%的無菌甘油,從而得出15%的甘油菌懸液。在操作過程中要保證所使用的甘油濃度保持在一個(gè)較低的程度,如果甘油濃度高于實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)將會(huì)造成細(xì)菌細(xì)胞滲透壓力產(chǎn)生變化,最終導(dǎo)致細(xì)菌發(fā)生死亡的問題。在細(xì)菌傳導(dǎo)完成后需要對(duì)試管進(jìn)行振動(dòng)和搖蕩,在搖時(shí)要注意對(duì)力度的控制,讓試管內(nèi)的各種物質(zhì)達(dá)到充分融合,再將融合后的溶液分別放置于無菌小試管中,最后將制作完成的甘油冷凍管放入-20℃的低溫環(huán)境中進(jìn)行預(yù)凍處理,并將其放在低于-80℃的超低溫環(huán)境中存放,且要保證冰箱的溫度至少為-30℃,其在這種冷凍環(huán)境下通常能夠保留的時(shí)長(zhǎng)為2a,而乙型溶血性鏈球菌對(duì)保存溫度的要求較高,在超低溫環(huán)境下該菌種的可保存時(shí)長(zhǎng)為3個(gè)月。
4.3 斜面低溫保藏法
斜面低溫保藏法是一種過渡性較強(qiáng)的保藏方法,其保藏時(shí)間較短,該方法是通過將菌種轉(zhuǎn)移至條件合適的試管培養(yǎng)基上,或?qū)⑵滢D(zhuǎn)接在茄子瓶的固體培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行培養(yǎng),在菌種成長(zhǎng)到一定程度之后再將其放入2-8℃的溫度環(huán)境中進(jìn)行保存。而微生物菌種的類型不同,其保存時(shí)間長(zhǎng)短也會(huì)有所差別。然而,這種保藏方法有一個(gè)非常突出的劣勢(shì)特點(diǎn),就是采用這種方式進(jìn)行保存的菌種極易發(fā)生狀態(tài)改變,如果菌種發(fā)生變異會(huì)對(duì)其后期傳代效果造成影響,使菌種受到污染。所以,這種方法只能在需要保藏時(shí)間較短的菌種類型的保藏工作中使用,并且還要對(duì)菌種的保藏狀態(tài)進(jìn)行隨時(shí)檢查。
4.4 液氮超低溫保藏法
4.4.1 制備菌懸液
將需要保藏的菌種接種在適宜的固體斜面培養(yǎng)基上,適宜溫度培養(yǎng),當(dāng)菌落健壯地長(zhǎng)滿斜面時(shí)取出。配制30%的甘油溶液進(jìn)行121℃下高壓火菌30min,將生長(zhǎng)良好的菌種斜面用生理鹽水制成菌懸液,菌濃度控制在107左右,然后加入等體積甘油水溶液混勻后制成15%的甘油菌懸液。
4.4.2 分裝菌懸液
把購(gòu)買的1.5ml的塑料凍存管擰松管帽置一燒杯中,外扎紗布、牛皮紙包扎好進(jìn)行121℃高壓火菌30min。然后將制備好的菌懸液分裝至1.5mL的塑料凍存管中,每支凍存管加入1mL菌懸液,擰緊管帽,并用膠布封口,分別在膠布和凍存管上做好菌種標(biāo)記。
4.4.3 液氮保藏
將菌液保持在0攝氏度的狀態(tài),然后將有關(guān)設(shè)備放置到零下70攝氏度左右的冰柜立面,然后進(jìn)行降溫。接著將相應(yīng)的凍存管放入到液氮罐妥善的保存,并且在罐的外面做好詳細(xì)的標(biāo)記工作,為以后使用菌種帶來方便。當(dāng)液氮中所存在的菌種需要復(fù)蘇時(shí),這時(shí)操作人員就應(yīng)當(dāng)將菌種提出來,放置到大約35-40攝氏度的環(huán)境里面進(jìn)行充分的攪拌,從而達(dá)到解凍的目的。為了避免菌種出現(xiàn)污染的情況,操作人員需要用75%的酒精進(jìn)行擦拭,當(dāng)表面完全干燥以后就可以使用相應(yīng)的容器將菌液按種到相應(yīng)的培養(yǎng)基上做好培養(yǎng)工作。
結(jié)束語
綜上所述,對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室中的菌種進(jìn)行保存的方法有很多種,這些方法的正確使用對(duì)菌種的保存質(zhì)量的提高具有積極作用。然而,若方法使用不合理使菌種的保存質(zhì)量嚴(yán)重降低,不但無法達(dá)到有效提高菌種保存效果的目的,還會(huì)造成適得其反的結(jié)果,因此一定要建立起科學(xué)規(guī)范的菌種復(fù)蘇、傳代和保存體系,這樣才能有效提高菌種保藏的科學(xué)性和規(guī)范性,以促進(jìn)微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)效率的提高,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確性,為微生物實(shí)驗(yàn)工作的完善奠定基礎(chǔ),從而推動(dòng)該行業(yè)在我國(guó)快速發(fā)展。
參考文獻(xiàn)
【關(guān)鍵詞】生物安全;微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室
生物安全( biosafety) 指的是避免危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露、向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施[1]。而實(shí)驗(yàn)室生物安全(laboratory biosafety)是我國(guó)衛(wèi)生行政管理的重要內(nèi)容,隨著科技進(jìn)步及生物技術(shù)的發(fā)展,目前實(shí)驗(yàn)室生物安全問題已經(jīng)成為科研單位、醫(yī)院、高校等重要場(chǎng)所管理及工作學(xué)習(xí)人員最為關(guān)心的內(nèi)容之一。
早在1983年,世界衛(wèi)生組織就出版了《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》來增強(qiáng)人們對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全問題的重視。但是,2003 年9 月到2004 年初在新加坡、臺(tái)灣以及北京連續(xù)發(fā)生的實(shí)驗(yàn)室人員感染SARS 冠狀病毒的事件,2005 年的H2N2流感病毒樣本風(fēng)波, 2010 年11 月至2011 年3 月東北某農(nóng)業(yè)大學(xué)發(fā)生嚴(yán)重的布魯氏菌實(shí)驗(yàn)室感染事件[2],這些生物安全事件的發(fā)生又一次次給人們敲響了警鐘。我校微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室是具有對(duì)周圍環(huán)境和教師及學(xué)生造成潛在生物危害的主要場(chǎng)所。本文將從以下幾個(gè)方面來分析一下我校的生物安全工作。
1 實(shí)驗(yàn)室功能介紹
我校微生物與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室(以下簡(jiǎn)稱微免實(shí)驗(yàn)室)主要由以下幾個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室組成:病原生物與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室、寄生蟲學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室。分別承擔(dān)了《病原生物與免疫學(xué)》、《微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)》、《免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)》、《寄生蟲學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)》等課程的實(shí)訓(xùn)教學(xué)任務(wù)。教學(xué)對(duì)象主要是五年制高職護(hù)理、助產(chǎn)、涉外、藥學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)等專業(yè)學(xué)生。
2 學(xué)生實(shí)驗(yàn)現(xiàn)狀分析
2.1 專業(yè)層次不一
病原生物與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的學(xué)生為高職護(hù)理等專業(yè)二年級(jí)的學(xué)生。她們的醫(yī)學(xué)知識(shí)相對(duì)薄弱、對(duì)病原生物的認(rèn)識(shí)也剛剛開始。而對(duì)于微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室和免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室來說,授課對(duì)象主要是高職醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)生,不同年級(jí)的學(xué)生會(huì)有交叉,既有剛剛接觸微生物學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ)和免疫學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ)的低年級(jí)學(xué)生,也有即將面臨畢業(yè)的高年級(jí)學(xué)生,他們無論在知識(shí)儲(chǔ)備、操作技能還是安全防護(hù)意識(shí)上都有一定差距。
2.2 生物安全意識(shí)弱
初次進(jìn)入微免實(shí)訓(xùn)室的學(xué)生,都是低年級(jí)學(xué)生,她們年齡偏小,存在著強(qiáng)烈的好奇心。尤其面對(duì)一些形形的病原標(biāo)本興趣濃厚。在實(shí)訓(xùn)過程中表現(xiàn)出來的問題有:聲音過于嘈雜、未經(jīng)允許觸摸標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)過的標(biāo)本隨意丟棄、帶與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的東西進(jìn)實(shí)驗(yàn)室、防護(hù)服穿著不當(dāng)?shù)鹊葐栴}。而且按照教學(xué)進(jìn)度,學(xué)生是先學(xué)習(xí)免疫學(xué)再學(xué)習(xí)微生物學(xué)知識(shí),也就導(dǎo)致第一次實(shí)訓(xùn)課時(shí),她們并不能充分認(rèn)識(shí)到自己所處的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境會(huì)對(duì)她們有什么樣的潛在危害,也沒有很好的生物安全保護(hù)意識(shí)。檢驗(yàn)專業(yè)的同學(xué)雖然有一定的專業(yè)基礎(chǔ),但在做一些膿汁標(biāo)本、大小便標(biāo)本檢驗(yàn)時(shí)依然存在麻痹大意的思想,容易造成環(huán)境的生物污染。同時(shí),實(shí)驗(yàn)室也保存有大量的病原微生物標(biāo)本,如:傷寒沙門菌、變形桿菌、克雷伯菌、炭疽桿菌等具有強(qiáng)致病性的微生物菌種,他們?cè)诓僮骷寄苌喜皇炀氁灿袑?dǎo)致菌種泄露造成生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。
2.3 實(shí)訓(xùn)內(nèi)容安排不合理
對(duì)于護(hù)理專業(yè),《病原生物與免疫學(xué)》課程的學(xué)習(xí)中,往往是先學(xué)習(xí)免疫學(xué),再學(xué)習(xí)微生物學(xué)。所以,學(xué)生沒有學(xué)習(xí)到微生物學(xué)的知識(shí)就進(jìn)行入微免實(shí)訓(xùn)室免疫室進(jìn)行實(shí)訓(xùn),這也造成了她們只是在老師的要求下去遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度,并不能很好的理解微生物會(huì)對(duì)她們和環(huán)境造成什么影響。而且由于實(shí)訓(xùn)場(chǎng)地限制,有些實(shí)驗(yàn)采取分組進(jìn)行,同學(xué)之間有著較強(qiáng)的互動(dòng)意識(shí),這也在一定程度上增加了生物安全危險(xiǎn)因素的傳播風(fēng)險(xiǎn)。
目前我校微免實(shí)驗(yàn)室主要承擔(dān)教學(xué)工作,由于學(xué)生數(shù)量龐大,且層次不一,盡管有相關(guān)制度的約束,但是生物安全工作仍然是每次實(shí)訓(xùn)課上教師要反復(fù)強(qiáng)調(diào)的問題。有研究表明,從事衛(wèi)生檢驗(yàn)工作人員發(fā)生職業(yè)病危害的概率比普通人群高5-7倍[3],所以在傳授技能的同時(shí)提高她們的自身防護(hù)意識(shí)就顯得非常重要。
3 實(shí)驗(yàn)室生物安全工作方向
3.1 制度建設(shè)
制度建設(shè)是實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作的最基本的環(huán)節(jié),對(duì)開展工作具有指導(dǎo)意義和約束力[4]。微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室不同于其他實(shí)驗(yàn)室,里面存放著很多具有致病性質(zhì)的病原生物,為了避免生物安全事故的發(fā)生,保證實(shí)驗(yàn)老師和學(xué)生的生命安全,我校制定了一系列實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)章制度。如《生物安全管理制度》、《生物安全保衛(wèi)制度和措施》、《工作人員執(zhí)行生物安全相關(guān)規(guī)定》、《生物安全工作內(nèi)部自查制度》、《生物安全管理人員及實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)制度》、《實(shí)驗(yàn)室人員準(zhǔn)入規(guī)定》及《發(fā)現(xiàn)存在生物安全問題時(shí)的反饋和糾正措施程序》等。根據(jù)學(xué)校相關(guān)制度,微免實(shí)驗(yàn)室也制定了微免實(shí)驗(yàn)室管理制度、實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)、儀器室管理制度、準(zhǔn)備室管理制度、大型儀器操作規(guī)范等來規(guī)范實(shí)驗(yàn)室工作人員、任課教師和學(xué)生的行為,避免實(shí)驗(yàn)室生物感染情況的發(fā)生。
3.2 提高生物安全意識(shí)
要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理人員及實(shí)驗(yàn)室人員對(duì)生物安全的認(rèn)識(shí),舉辦生物安全管理為內(nèi)容的學(xué)習(xí)班,通過學(xué)習(xí)提高相關(guān)人員特別是微免實(shí)驗(yàn)室工作人員的生物安全意識(shí),轉(zhuǎn)變觀念,為做好生物安全工作起積極推動(dòng)作用。對(duì)于學(xué)生,如護(hù)理、助產(chǎn)、檢驗(yàn)等專業(yè)畢業(yè)生將來從事臨床一線工作,她們負(fù)責(zé)標(biāo)本的直接采集和檢驗(yàn),如果不注意生物安全,其被感染的可能性很大。所以在平時(shí)的實(shí)訓(xùn)課中,更應(yīng)該加強(qiáng)對(duì)她們生物安全意識(shí)的培養(yǎng),幫助她們養(yǎng)成良好的工作習(xí)慣。包括學(xué)習(xí)學(xué)校制定的各種生物安全制度、認(rèn)真研讀實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè),進(jìn)行生物安全專題培訓(xùn)等。
3.3 加強(qiáng)學(xué)生技能訓(xùn)練
在實(shí)訓(xùn)過程中,對(duì)學(xué)生嚴(yán)格要求,勤學(xué)苦練增強(qiáng)專業(yè)技能。如對(duì)于護(hù)理、助產(chǎn)專業(yè),要加強(qiáng)消毒滅菌操作練習(xí),這些工作是確保醫(yī)療安全的基礎(chǔ)[5]。對(duì)于檢驗(yàn)專業(yè)來說,每天面對(duì)各種各樣的臨床標(biāo)本,各類標(biāo)本中都有很多未知的病原生物,這就要求他們更應(yīng)加強(qiáng)對(duì)生物安全的重視程度[6]。學(xué)生在實(shí)訓(xùn)操作前應(yīng)穿好工作服,必要時(shí)還應(yīng)該帶好口罩和手套等防護(hù)用品,認(rèn)真聽老師講解的操作要領(lǐng)和注意事項(xiàng)后,方可進(jìn)行實(shí)訓(xùn)。對(duì)于涉及病原性細(xì)菌的接種、分離、培養(yǎng)等操作時(shí),要嚴(yán)格要求無菌操作,操作過程要規(guī)范、切忌毛手毛腳,避免危險(xiǎn)性病原生物對(duì)自己及周圍環(huán)境造成污染。在進(jìn)行免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)時(shí),由于涉及大量的具有傳染性的血清標(biāo)本,如梅毒陽(yáng)性血清、乙肝陽(yáng)性血清等,操作時(shí)一定要做好防護(hù),避免其經(jīng)過皮膚傷口感染。
3.4 科學(xué)合理安排實(shí)訓(xùn)內(nèi)容
對(duì)于實(shí)訓(xùn)內(nèi)容的安排應(yīng)該遵循由易到難、由簡(jiǎn)單到復(fù)雜的原則。對(duì)于一些病原生物與免疫學(xué)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容最好先安排微生物學(xué)內(nèi)容,因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室存儲(chǔ)的各種病原生物是最主要的生物安全危險(xiǎn)因素。對(duì)微生物的了解可以幫助她們樹立無菌觀念、為今后的實(shí)訓(xùn)內(nèi)容打下安全基礎(chǔ)。
3.5 杜絕各類生物安全隱患
任何實(shí)訓(xùn)課上,老師都要對(duì)學(xué)生的操作情況認(rèn)真指導(dǎo)。杜絕學(xué)生在觀察細(xì)菌培養(yǎng)物、病原性細(xì)菌鑒定、臨床標(biāo)本鑒定等實(shí)訓(xùn)課上發(fā)生菌液等危險(xiǎn)因子的外漏。如果遇到此類情況,老師一定要在第一時(shí)間做好消毒滅菌措施,必要時(shí),匯報(bào)實(shí)驗(yàn)室管理人員妥善處理。
綜上,生物安全建設(shè)依然是一項(xiàng)長(zhǎng)期而又艱巨的工作,作為一所醫(yī)學(xué)類院校,良好的醫(yī)學(xué)素養(yǎng)是我校對(duì)學(xué)生的培養(yǎng)目標(biāo)之一,而生物安全素養(yǎng)作為醫(yī)學(xué)素養(yǎng)的一部分直接關(guān)系到學(xué)生今后在工作中的自身安全。雖然工作之后也有諸多培訓(xùn),但在學(xué)生階段對(duì)她們行為習(xí)慣的養(yǎng)成卻是非常關(guān)鍵的時(shí)期。生物安全牽涉到我校師生的生命財(cái)產(chǎn)、關(guān)系著我校各項(xiàng)教學(xué)、科研工作的順利發(fā)展,我校將繼續(xù)改進(jìn)生物安全相關(guān)制度、規(guī)范實(shí)驗(yàn)室使用規(guī)范、改善教學(xué)內(nèi)容、對(duì)老師和學(xué)生嚴(yán)格要求,在學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)和全體師生的共同努力下做好生物安全工作,杜絕任何生物安全事故的發(fā)生。
【參考文獻(xiàn)】
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為進(jìn)一步規(guī)范高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批行為,加強(qiáng)動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理,現(xiàn)就有關(guān)事項(xiàng)通知如下。
一、嚴(yán)格掌握高致病動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批條件
高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng),事關(guān)重大動(dòng)物疫病防控,事關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作人員及廣大人民群眾身體健康和生命安全。省級(jí)以上獸醫(yī)主管部門要高度重視高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)管理,認(rèn)真貫徹實(shí)施《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》,按照《高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理審批辦法》規(guī)定的條件,嚴(yán)格高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批。
(一)高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別。按照《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》和《高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理審批辦法》規(guī)定,一級(jí)、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng);三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室需要從事某種高致病性動(dòng)物病原微生物或者疑似高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的,應(yīng)當(dāng)經(jīng)農(nóng)業(yè)部或者省、自治區(qū)、直轄市人民政府獸醫(yī)行政管理部門批準(zhǔn)。經(jīng)省級(jí)以上獸醫(yī)主管部門批準(zhǔn)的高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng),必須按照《動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全要求細(xì)則》(附后)的要求,在相應(yīng)生物安全級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)開展有關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。
(二)高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批條件。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事高致病性動(dòng)物病原微生物或者疑似高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的,應(yīng)當(dāng)具備下列條件:一是必須取得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的《高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格證書》,并在有效期內(nèi);二是實(shí)驗(yàn)活動(dòng)僅限于與動(dòng)物病原微生物菌(毒)種或者樣本有關(guān)的研究、檢測(cè)、診斷和菌(毒)種保藏等;三是科研項(xiàng)目立項(xiàng)前必須經(jīng)農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)。
二、嚴(yán)格規(guī)范高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批程序
省級(jí)以上獸醫(yī)主管部門應(yīng)當(dāng)按照《高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理審批辦法》和農(nóng)業(yè)部第898號(hào)公告規(guī)定的審批主體、審批程序,做好高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批工作。
(一)審批主體。從事下列高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的,應(yīng)當(dāng)報(bào)農(nóng)業(yè)部審批:一是豬水泡病病毒、非洲豬瘟病毒、非洲馬瘟病毒、牛海綿狀腦病病原和癢病病原等我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)的動(dòng)物病原微生物;二是牛瘟病毒、牛傳染性胸膜肺炎絲狀支原體等我國(guó)已經(jīng)宣布消滅的動(dòng)物病原微生物;三是高致病性禽流感病毒、口蹄疫病毒、小反芻獸疫病毒等烈性動(dòng)物傳染病病毒。從事其他高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的,由省、自治區(qū)、直轄市人民政府獸醫(yī)主管部門審批。
(二)審批程序。實(shí)驗(yàn)室申請(qǐng)從事高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的,應(yīng)當(dāng)向所在地省、自治區(qū)、直轄市人民政府獸醫(yī)主管部門提出申請(qǐng),并提交下列材料:一是高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)申請(qǐng)表一式兩份;二是高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格證書復(fù)印件;三是從事與高致病性動(dòng)物病原微生物有關(guān)的科研項(xiàng)目,還應(yīng)當(dāng)提供科研項(xiàng)目立項(xiàng)證明材料。省級(jí)以上獸醫(yī)主管部門按照職責(zé)分工,應(yīng)當(dāng)在收到申請(qǐng)材料之日起15日內(nèi)做出是否審批的決定。
三、切實(shí)加強(qiáng)高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)監(jiān)督管理
高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)管理是實(shí)驗(yàn)室生物安全監(jiān)管的重點(diǎn)內(nèi)容。各級(jí)獸醫(yī)主管部門一定要認(rèn)真貫徹實(shí)施《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》的各項(xiàng)規(guī)定,采取切實(shí)有效措施,對(duì)高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)實(shí)行全程監(jiān)管,確保實(shí)驗(yàn)室生物安全,確保實(shí)驗(yàn)室工作人員和廣大人民群眾身體健康。
(一)嚴(yán)肅查處違法從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的行為。各級(jí)獸醫(yī)主管部門要嚴(yán)格執(zhí)行高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)事前審批制度。對(duì)未經(jīng)批準(zhǔn)從事高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的,要依法嚴(yán)肅查處,三年內(nèi)不再批準(zhǔn)該實(shí)驗(yàn)室從事任何高致病性動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。
(二)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)監(jiān)督檢查。各級(jí)獸醫(yī)主管部門要定期組織實(shí)驗(yàn)活動(dòng)監(jiān)督檢查。重點(diǎn)檢查實(shí)驗(yàn)室是否按照有關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng),及時(shí)糾正違規(guī)操作行為。要督促實(shí)驗(yàn)室加強(qiáng)內(nèi)部管理,制定并落實(shí)安全管理、安全防護(hù)、感染控制和生物安全事故應(yīng)急預(yù)案等規(guī)章制度。
【關(guān)鍵詞】微生物 實(shí)驗(yàn)教學(xué) 實(shí)驗(yàn)技能
《動(dòng)物微生物學(xué)》是動(dòng)物醫(yī)學(xué)、畜牧獸醫(yī)、動(dòng)檢及畜牧專業(yè)的必修專業(yè)基礎(chǔ)課,其實(shí)驗(yàn)技能是臨床操作及科學(xué)研究中必備的基本技術(shù)。掌握良好的微生物實(shí)驗(yàn)操作技能可以為以后的臨床、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)和科學(xué)研究工作打下良好的基礎(chǔ)。筆者在多年的教學(xué)中對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)課程的講授有一下幾點(diǎn)體會(huì)。
一、講授與示教相結(jié)合,強(qiáng)調(diào)示教作用
實(shí)驗(yàn)課程中首先要講授清楚實(shí)驗(yàn)的目的、所用儀器材料、具體實(shí)驗(yàn)方法,但單純的講授和板書學(xué)生不容易接受,難與實(shí)際操作結(jié)合。所以,在講授過程中或結(jié)束后,教師親自操作示范,讓學(xué)生有一個(gè)感觀上的直接認(rèn)識(shí),并且在示教過程中強(qiáng)調(diào)注意事項(xiàng)、解釋操作原理,學(xué)生掌握起來更加輕松容易。有條件的可以利用相關(guān)教學(xué)錄像達(dá)到這一目的。有了直觀的感受,學(xué)生更容易模仿操作,已達(dá)到更好的教學(xué)效果。在實(shí)驗(yàn)課程中,示教是不可缺少的一部分。
二、留出短暫時(shí)間供學(xué)生回顧體會(huì)
講解、示教結(jié)束后,根據(jù)所講內(nèi)容的多少留出3―5min時(shí)間,讓學(xué)生回顧剛剛講過的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,體會(huì)操作的方法和注意,鼓勵(lì)學(xué)生對(duì)清楚的知識(shí)點(diǎn)提出疑問,允許學(xué)生彼此之間輕聲地相互交流。在這短暫的幾分鐘時(shí)間里,學(xué)生可以對(duì)教師的講授和示教過程進(jìn)行自我總結(jié)和體會(huì),不同的學(xué)生會(huì)有不同的問題出現(xiàn)。再通過與教師或同學(xué)的交流,及時(shí)解決出現(xiàn)的問題。
三、學(xué)生代表模擬講解
為調(diào)動(dòng)實(shí)驗(yàn)課程中學(xué)生的積極性,也為檢驗(yàn)學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的接受情況,隨機(jī)選擇2~3名學(xué)生到講臺(tái)進(jìn)行模擬操作,講述操作中的注意事項(xiàng);同時(shí)要求其他學(xué)生仔細(xì)觀察其操作,對(duì)其出現(xiàn)的錯(cuò)誤操作及時(shí)進(jìn)行糾正。通過此項(xiàng)內(nèi)容不僅可以有效地檢查學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的理解情況,及時(shí)找到學(xué)生易出錯(cuò)的環(huán)節(jié)并及時(shí)糾正而且可以鍛煉學(xué)生的語言表達(dá)能力,增強(qiáng)學(xué)生的緊迫感,提高學(xué)生上課的注意力。
四、注重學(xué)生操作時(shí)的指導(dǎo)
實(shí)驗(yàn)課程中,教師的教授只是課程的一小部分,另外一部分就是學(xué)生自己動(dòng)手操作。在這部分時(shí)間中,教師要關(guān)注學(xué)生操作的方式方法。由于學(xué)生都是初次接觸微生物實(shí)驗(yàn)操作,難免會(huì)在操作中出現(xiàn)錯(cuò)誤,教師如能及時(shí)予以糾正,必將有助于學(xué)生形成良好的實(shí)驗(yàn)技能。例如,在微生物實(shí)驗(yàn)過程中要注意無菌操作,但是對(duì)于初學(xué)者來說是說起來容易做起來能,學(xué)生往往是講得條條有理,但做起來總出錯(cuò)誤。教師如能及時(shí)的指出學(xué)生的錯(cuò)誤,學(xué)生可以立即改正,久而久之形成良好的無菌操作習(xí)慣。
五、定期批改實(shí)驗(yàn)報(bào)告
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后要求學(xué)生按照學(xué)校的統(tǒng)一規(guī)定書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告,并定期批改。通過批改實(shí)驗(yàn)報(bào)告可以掌握學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的理解程度、完成情況,并及時(shí)做出反饋;學(xué)生通過實(shí)驗(yàn)報(bào)告的分?jǐn)?shù)和批語可以了解自己的問題所在,以便在以后的實(shí)驗(yàn)中不斷改進(jìn)。
六、建立合理的考核制度
衡量實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)質(zhì)量,重要的一個(gè)指標(biāo)就是學(xué)生的掌握情況。如何衡量學(xué)生的掌握情況,這就要建立一個(gè)合理的考核制度。筆者在實(shí)踐中采取實(shí)驗(yàn)操作考核的形式,首先自制考核項(xiàng)目條,由學(xué)生隨機(jī)抽取,然后按照所抽取的項(xiàng)目進(jìn)行操作,教師根據(jù)學(xué)生操作情況打分,以便檢驗(yàn)學(xué)生的學(xué)習(xí)效果。
對(duì)于任何一門課程而言,實(shí)驗(yàn)課程是與今后的工作和科研密切相關(guān)的一項(xiàng)內(nèi)容,也是學(xué)生必須掌握的一項(xiàng)內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)課程質(zhì)量的高低直接影響著學(xué)生的素質(zhì)能力,對(duì)實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)質(zhì)量不容忽視。筆者僅就個(gè)人在教學(xué)中的一些經(jīng)驗(yàn)體會(huì)做以簡(jiǎn)單介紹,希望能有一定幫助。
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關(guān)鍵詞:纖維機(jī)構(gòu) 微生物實(shí)驗(yàn)室 質(zhì)量控制
目前,我國(guó)紡織品檢測(cè)涉及微生物的標(biāo)準(zhǔn)主要有:《羽絨羽毛檢驗(yàn)方 法》( GB/T 10288―2003)?《抗 菌 針 織 品》( FZ/T 73023―2006)?《絮用纖維制品通用技術(shù)要求》(GB 18383―2007)?《地毯抗微生物活性測(cè)定》(GB/T 23164―2008)?《 抗 菌 毛 巾 》 ( FZ /T62015―2009) 等?檢測(cè)的產(chǎn)品涵蓋羽絨羽毛及其制品填充物?抗菌針織品?生活用絮用纖維制品?地毯?抗菌毛巾等?涉及的微生物種類主要包括:嗜溫性需氧菌?糞便鏈球菌?還原亞硫酸鹽梭狀芽孢桿菌?沙門氏菌?綠膿桿菌?溶血性鏈球菌?大腸桿菌?金黃色葡萄球菌?白色念珠菌等?作為纖檢機(jī)構(gòu),應(yīng)具備上述諸多標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)能力,最根本的是需形成科學(xué)?安全?高效的微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制體系?
1、培養(yǎng)基
應(yīng)建立和保持有效的適合試驗(yàn)范圍的培養(yǎng)基(試劑)質(zhì)量控制程序?培養(yǎng)基是指液體?半固體或固體形式的,含天然或合成成分,用于保證微生物繁殖或保持其活力的物質(zhì)?其質(zhì)量的好壞將直接影響最終的檢測(cè)結(jié)果?
1.1 購(gòu)買
購(gòu)買培養(yǎng)基時(shí),要選擇國(guó)內(nèi)外知名品牌和市場(chǎng)信譽(yù)度高的產(chǎn)品,選擇有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè)?購(gòu)買的數(shù)量要有計(jì)劃,應(yīng)控制在一年內(nèi)使用完畢,盡可能買小包裝的產(chǎn)品?
1.2 接收
接收培養(yǎng)基時(shí),供應(yīng)商需提供的文件有:培養(yǎng)基?獨(dú)立成分?添加成分的名稱及產(chǎn)品編號(hào);批號(hào);培養(yǎng)基使用前的 pH 值;儲(chǔ)藏信息和有效期;技能評(píng)價(jià)和所使用的測(cè)試菌株;技術(shù)數(shù)據(jù)清單;質(zhì)控證書;必要的危害數(shù)據(jù)?實(shí)驗(yàn)室收到培養(yǎng)基后,需檢查?記錄以下項(xiàng)目:培養(yǎng)基的名稱?批號(hào)?數(shù)量;接收日期;首次開封日期;有效期;包裝及其完整性;內(nèi)容物的感官檢查?
對(duì)于關(guān)鍵性的培養(yǎng)基,必須采取技術(shù)性驗(yàn)收,主要包括物理指標(biāo)控制(pH 值?瓊脂層的厚度?色澤?透明度和是否存在肉眼可見的雜質(zhì)?凝膠穩(wěn)定性?黏稠度和濕度)和微生物指標(biāo)控制(污染測(cè)試?生長(zhǎng)率測(cè)試?選擇性測(cè)試?特異性測(cè)試)?發(fā)現(xiàn)下述情況的培養(yǎng)基應(yīng)拒收:超過保質(zhì)期;發(fā)生結(jié)塊?顏色異常?脫水?有微生物生長(zhǎng)和其他變質(zhì)跡象?
1.3 保存和使用
應(yīng)嚴(yán)格按照供應(yīng)商提供的儲(chǔ)存條件?有效期和使用方法進(jìn)行培6養(yǎng)基的保存和使用?通常情況下,基礎(chǔ)培養(yǎng)基在 4 ℃ 冰箱中保存應(yīng)不超過 3 個(gè)月,或在室溫(20 ℃)下保存不超過 1 個(gè)月?
1.4 制備記錄
對(duì)各種培養(yǎng)基(試劑)的制備過程需有相應(yīng)記錄,其內(nèi)容包括:培養(yǎng)基的名稱和類型;配置日期和配置人員的標(biāo)識(shí);培養(yǎng)基的體積;分裝的體積;成分?每種成分物質(zhì)的含量?制造商?批號(hào);最初 pH 值和最終 pH 值;無菌措施?
2、菌種
應(yīng)建立所有菌種或標(biāo)本的收集?接種傳代?確認(rèn)試驗(yàn)?貯藏的質(zhì)量控制程序?
2.1 收集
標(biāo)準(zhǔn)菌種或標(biāo)本需從認(rèn)可的菌種保藏中心[如中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CMCC)]或經(jīng) ISO9001 認(rèn)證的商業(yè)機(jī)構(gòu)[如美國(guó)細(xì)菌收集和分型中心(ATCC)]處獲得?接收菌種時(shí),需記錄菌種的名稱?來源?接收日期等信息?
2.2 接種傳代
將微生物的培養(yǎng)物或含有微生物的樣品移植到培養(yǎng)基上的操作稱之為接種,方法主要有斜面接種?液體接種等?接種傳代時(shí)需記錄菌種名稱?接種日期?接種數(shù)量?支取數(shù)量?傳代序數(shù)?廢棄處理等信息?所有標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物從儲(chǔ)備菌株傳代培養(yǎng)次數(shù)不得超過 5 次,除非標(biāo)準(zhǔn)方法中要求并規(guī)定,或?qū)嶒?yàn)室能夠提供文件化證據(jù)證明其相關(guān)特性沒有改變?工作菌株不能傳代,不可替代標(biāo)準(zhǔn)菌株?標(biāo)準(zhǔn)菌株的商業(yè)派生菌株僅可用作工作菌株?
2.3 確認(rèn)試驗(yàn)
為保證試驗(yàn)質(zhì)量,需對(duì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)?確認(rèn)試驗(yàn)主要包括菌種純化和生理生化鑒定(革蘭氏染色?糖類發(fā)酵試驗(yàn)?乙酰甲基甲醇試驗(yàn)?甲基紅試驗(yàn)?吲哚試驗(yàn)),需記錄好菌種純化方式及各試驗(yàn)的結(jié)果等信息?
2.4 貯藏
目前,貯藏方法主要有斜面貯藏?半固體穿刺貯藏?石蠟油封存?沙土管貯藏等?其中,冷凍干燥貯藏比較常見?實(shí)驗(yàn)員需記錄貯藏方法?貯藏條件?有效期等信息?貯藏時(shí),對(duì)于購(gòu)買的標(biāo)準(zhǔn)菌株,要以原始的包裝形式進(jìn)行貯藏,復(fù)蘇和使用應(yīng)按照廠商提供的使用說明進(jìn)行?
冷凍菌種在 - 70 ℃ 以下可無限期存放,在 - 50 ~ - 70 ℃ 可存放一年,但此方法并不適用于所有菌株?
3、廢棄物處理
對(duì)于微生物實(shí)驗(yàn)室涉及到的棄置的培養(yǎng)基及其他可能受到污染的廢棄物,都應(yīng)采用安全且符合相關(guān)法律法規(guī)規(guī)定的方式進(jìn)行處理?可參考的方法有:-使用適當(dāng)濃度的自配或商業(yè)液體消毒劑(次氯酸鹽?乙醇?甲醛?戊二醛?碘載體等)處理一定時(shí)間,或121 ℃高壓滅菌至少30 min?-記錄并保留廢棄物處理的記錄,包括廢棄物名稱?處理原因?處理方式?處理日期?處理人等?
4、設(shè)施與人員
微生物實(shí)驗(yàn)室的布局以區(qū)域盡頭為宜,以減少潛在的對(duì)樣本的污染和對(duì)人員的危害?對(duì)無菌條件要求的工作區(qū)域,應(yīng)予以明確標(biāo)識(shí),并能有效地控制?監(jiān)測(cè)和記錄?實(shí)驗(yàn)室內(nèi)無菌工器具和器皿應(yīng)有明顯的標(biāo)識(shí),目的是與非無菌工器具和器皿加以區(qū)別?微生物檢測(cè)所涉及的常規(guī)的儀器設(shè)備的情節(jié)?維護(hù),應(yīng)做好相應(yīng)的記錄?無菌室空氣滅菌效果應(yīng)至少每月檢驗(yàn)一次,方法可參考沉降法,同時(shí)做好記錄?
專業(yè)人才的缺乏是制約纖檢機(jī)構(gòu)開展紡織品微生物檢測(cè)的最大瓶頸,應(yīng)加大對(duì)此類人才的引進(jìn)與儲(chǔ)備?由于微生物檢測(cè)的菌種多為致病菌,因此從事檢測(cè)的人員須具備一定的微生物學(xué)或相近專業(yè)的資質(zhì)?對(duì)新進(jìn)員工應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的檢測(cè)技能的培訓(xùn),結(jié)束后需進(jìn)行確認(rèn),以保證其具備勝任工作所必需的設(shè)備操作?微生物檢測(cè)技能,符合實(shí)驗(yàn)室生物安全要求,并開展針對(duì)所有級(jí)別檢測(cè)人員的繼續(xù)教育計(jì)劃?
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我校于2014年開始招收高職醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)學(xué)生,在此之前,主要教學(xué)對(duì)象為中職醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)學(xué)生。中職醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)側(cè)重于培養(yǎng)學(xué)生相關(guān)檢驗(yàn)技術(shù),而高職醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)在培養(yǎng)學(xué)生相關(guān)技能的基礎(chǔ)之上,還要培養(yǎng)學(xué)生科研思維能力與創(chuàng)新能力[1]。針對(duì)招生層次的變化,明確目前我校臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)存在的問題,才能有的放矢。我校臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)存在以下問題:(1)我校相關(guān)教師的中職臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)豐富,而高職課程教學(xué)目標(biāo)和教學(xué)理念均有別于中職課程,需要相關(guān)教師進(jìn)行深入學(xué)習(xí)和研究,探索更為科學(xué)的教學(xué)方案與教學(xué)手段[2]。(2)我校臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)一般采用特定的形式開展,實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果都是確定的,學(xué)生缺少獨(dú)立思考機(jī)會(huì),實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力難以提高。這就需要將實(shí)驗(yàn)教學(xué)與臨床實(shí)際聯(lián)系起來,并構(gòu)建科學(xué)的臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系[3]。(3)目前,我校臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)與臨床實(shí)踐需求存在一定的差距,在今后的實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中,學(xué)校應(yīng)多與附近的醫(yī)院合作,充分利用其平臺(tái)的優(yōu)質(zhì)資源,開設(shè)應(yīng)用性、綜合性實(shí)驗(yàn),開闊學(xué)生視野,提高教學(xué)質(zhì)量。
2臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)體系改革
2.1改變基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)手段,建立以研究為主導(dǎo)的教學(xué)體系?;A(chǔ)實(shí)驗(yàn)著重培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?,?qiáng)化專業(yè)基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)[4]。本教研室對(duì)臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法進(jìn)行改革,遵循以學(xué)生動(dòng)手為主、教師示教為輔與多媒體教學(xué)彌補(bǔ)的原則,培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?。?duì)于一些實(shí)驗(yàn)室難以開展的最新實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,教師可以通過微視頻演示給學(xué)生,讓學(xué)生了解學(xué)科最新研究動(dòng)態(tài)和技術(shù)。具體基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中,讓學(xué)生參與實(shí)驗(yàn)教學(xué)的每個(gè)環(huán)節(jié)[5],包括準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)過程、實(shí)驗(yàn)研討、實(shí)驗(yàn)總結(jié)以及科研活動(dòng),實(shí)現(xiàn)教學(xué)相長(zhǎng)。學(xué)生輪流參與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備過程,教師鼓勵(lì)學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中提出問題,組織學(xué)生以5~6人一組討論實(shí)驗(yàn)過程中遇到的問題。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,每組學(xué)生根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及遇到的具體問題進(jìn)行總結(jié),歸納成敗原因,總結(jié)經(jīng)驗(yàn)。2.2建立綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系。綜合性實(shí)驗(yàn)是指在學(xué)生具有一定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)和基本操作技能的基礎(chǔ)上,對(duì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)?zāi)芰εc實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行綜合訓(xùn)練的一種復(fù)合性實(shí)驗(yàn)[6]。設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)是指給定實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、要求和?shí)驗(yàn)條件,由學(xué)生自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。我校臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)課程實(shí)驗(yàn)課和理論課學(xué)時(shí)比為1∶1,綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系的構(gòu)建是培養(yǎng)臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)人才的關(guān)鍵[7]。我院傳統(tǒng)臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課程設(shè)計(jì)見表1,改革后的臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課程模塊設(shè)計(jì)見表2。本教研室將綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)教學(xué)分為以下幾個(gè)環(huán)節(jié)。2.2.1抽簽選擇臨床模擬標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)教師準(zhǔn)備臨床模擬標(biāo)本,例如感染病原菌的尿液、血液、痰液、腦脊液、糞便等,學(xué)生抽簽進(jìn)行實(shí)驗(yàn),兩名學(xué)生一組或者4名學(xué)生一組。2.2.2設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。每組學(xué)生應(yīng)用所學(xué)知識(shí),擬定實(shí)驗(yàn)方案,設(shè)計(jì)微生物學(xué)檢驗(yàn)程序。2.2.3實(shí)施實(shí)驗(yàn)方案。學(xué)生根據(jù)確定的方案進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在學(xué)生實(shí)驗(yàn)過程中,教師引導(dǎo)學(xué)生獨(dú)立思考,協(xié)助學(xué)生解決在實(shí)驗(yàn)過程中遇到的問題。教師應(yīng)做到總體調(diào)控,把握學(xué)生實(shí)驗(yàn)進(jìn)度,保證其進(jìn)行按時(shí)完成實(shí)驗(yàn)。2.2.4實(shí)驗(yàn)總結(jié)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,各小組撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告,同時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行總結(jié),討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度,歸納實(shí)驗(yàn)成敗原因,總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),完善實(shí)驗(yàn)方案及實(shí)驗(yàn)步驟。2.2.5成績(jī)?cè)u(píng)定。教師根據(jù)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)報(bào)告等對(duì)其進(jìn)行綜合評(píng)定,給出綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)成績(jī)。2.3構(gòu)建開放式的實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式。開放式的實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式是一種先進(jìn)的現(xiàn)代化實(shí)驗(yàn)教學(xué)方式,是有利于培養(yǎng)學(xué)生實(shí)踐能力、提高學(xué)生綜合素質(zhì)的一種模式。開放實(shí)驗(yàn)室不僅是時(shí)間和空間上的開放,更應(yīng)該是實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(實(shí)驗(yàn)課程、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、研究課程)和師資的開放[8]。教研室每學(xué)期接納一些自愿參與研究的學(xué)生,學(xué)生利用課余時(shí)間走進(jìn)實(shí)驗(yàn)室,開展實(shí)驗(yàn)研究,在此過程中,學(xué)生需要查閱大量資料以及進(jìn)行簡(jiǎn)單的課題研究,掌握課題設(shè)計(jì)思想和實(shí)驗(yàn)技術(shù),撰寫實(shí)驗(yàn)研究論文,這能激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣,實(shí)現(xiàn)教學(xué)與科研一體化。2.4逐步建立醫(yī)院實(shí)踐體系。本教研室與長(zhǎng)期從事臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)的醫(yī)技人員和教學(xué)經(jīng)驗(yàn)豐富的教師共同建立了醫(yī)院實(shí)踐體系。我院對(duì)2015級(jí)、2016級(jí)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)進(jìn)行教學(xué)改革,共6個(gè)班級(jí),改革班學(xué)生在校掌握基本技能后,進(jìn)入醫(yī)院接受實(shí)驗(yàn)教學(xué),共設(shè)接種、培養(yǎng)、鑒定3個(gè)項(xiàng)目,每個(gè)項(xiàng)目都有明確的教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)要求,同時(shí)對(duì)改革班學(xué)生期末考試成績(jī)和畢業(yè)實(shí)習(xí)期間的表現(xiàn)進(jìn)行調(diào)查分析。
3臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課程考核體系改革
本教研室建立以能力考核為核心的實(shí)驗(yàn)課程多元化考核模式,重視對(duì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)過程的評(píng)價(jià)[9]。實(shí)驗(yàn)成績(jī)主要由基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)成績(jī)、綜合性實(shí)驗(yàn)成績(jī)、開放性實(shí)驗(yàn)成績(jī)、臨床試驗(yàn)成績(jī)組成?;A(chǔ)實(shí)驗(yàn)成績(jī)由教師給出,占總成績(jī)的30%;綜合性實(shí)驗(yàn)成績(jī)包括小組成績(jī)和個(gè)人成績(jī)兩部分,其中小組成績(jī)由教師給出,占總成績(jī)的15%,個(gè)人成績(jī)由小組成員給出,占總成績(jī)的15%;開放性實(shí)驗(yàn)成績(jī)由教師給出,占總成績(jī)的10%;臨床試驗(yàn)成績(jī)由醫(yī)院帶教教師給出,占總成績(jī)的30%。
4討論
在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中,教師利用新型教學(xué)手段,使學(xué)生掌握基本實(shí)驗(yàn)操作技能,同時(shí)建立綜合性、開放式實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系,將實(shí)驗(yàn)教學(xué)與科研活動(dòng)緊密聯(lián)系起來,培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考、解決難題能力。此外,逐步完善開放性教學(xué)模式,提高學(xué)生學(xué)習(xí)主動(dòng)性。實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革將課堂延伸到工作崗位,能幫助學(xué)生樹立正確的擇業(yè)觀和就業(yè)觀,增強(qiáng)學(xué)生職業(yè)認(rèn)同感。實(shí)行多元化的臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課程考核方式,有助于提升學(xué)生獨(dú)立操作能力。
關(guān)鍵詞:微生物實(shí)驗(yàn)課;護(hù)生;無菌觀念
無菌操作技術(shù)是護(hù)理工作的重點(diǎn),它貫穿于各項(xiàng)護(hù)理技術(shù)操作中,是每個(gè)護(hù)生必須嚴(yán)格遵守的護(hù)理技術(shù)操作規(guī)程,是護(hù)理質(zhì)量的重要保證,也是減少醫(yī)院感染的重要措施。另外,護(hù)士作為醫(yī)院與病人接觸最密切的人群,有太多的操作機(jī)會(huì)遭致感染。如在進(jìn)入臨床實(shí)習(xí)或工作前,護(hù)生就具有了較強(qiáng)的無菌觀念,那對(duì)今后的護(hù)理工作非常有益。也可有效地保護(hù)自己免受感染。無菌技術(shù)基于無菌觀念。但無菌觀念的培養(yǎng)并不容易,靠單純記憶和模仿是很難達(dá)到的。如何強(qiáng)化護(hù)生的無菌觀念,提高無菌操作技能,不僅是護(hù)理教學(xué)的重點(diǎn),也是其他相關(guān)學(xué)科的教學(xué)重點(diǎn)。
微生物實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目與無菌操作聯(lián)系密切,在各項(xiàng)操作中均能找到二者的結(jié)合點(diǎn),并且微生物開課在先,是學(xué)生最先接觸無菌技術(shù)的課程,如果能充分利用微生物實(shí)驗(yàn)資源,建立并強(qiáng)化學(xué)生的無菌操作觀念,對(duì)提高其無菌操作能力非常重要,也為護(hù)理教學(xué)起到很好的鋪墊作用,為今后護(hù)理工作打下良好的基礎(chǔ)。
一、恰當(dāng)選擇實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
微生物實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目種類繁多,雖各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)均蘊(yùn)涵無菌操作技術(shù),但我們根據(jù)教學(xué)大綱和護(hù)理專業(yè)的特點(diǎn),選擇開設(shè)了一些更利于護(hù)生無菌觀念培養(yǎng)的項(xiàng)目。如革蘭染色、空氣中細(xì)菌的培養(yǎng)、細(xì)菌的接種技術(shù)、皮膚消毒實(shí)驗(yàn)、消毒劑消毒效果的檢測(cè)等。這些實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,不但能讓學(xué)生更深刻地認(rèn)識(shí)到,微生物不但在自然界分布廣范,在人體表也有大量的細(xì)菌存在。在今后的臨床護(hù)理工作中,如不進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作如皮膚不徹底消毒、在配藥、點(diǎn)滴時(shí)不戴口罩,皮膚和口腔中的細(xì)菌就會(huì)導(dǎo)致藥物污染、傷口感染等,給患者帶來極大的身心傷害,和不必要的經(jīng)濟(jì)損失。革蘭染色和細(xì)菌的接種技術(shù)兩項(xiàng)試驗(yàn)包含了多種無菌技術(shù),是培養(yǎng)學(xué)生無菌觀念,強(qiáng)化無菌操作的最好項(xiàng)目。
二、建立無菌觀念
在第一次實(shí)驗(yàn)課上,我們非常明確指出:護(hù)生在微生物實(shí)驗(yàn)課上必須嚴(yán)格遵守如下規(guī)則:進(jìn)實(shí)驗(yàn)室必須穿白服并系好扣子;非實(shí)驗(yàn)必須用品不得帶入實(shí)驗(yàn)室;實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止飲食;凡具有傳染性的培養(yǎng)物、材料及小動(dòng)物等需按要求處理,不得隨便亂放或用水沖洗;實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何物品不得攜出室外;實(shí)驗(yàn)過程中一旦發(fā)生意外,如劃破皮膚、細(xì)菌污染臺(tái)面、地面、手、衣物時(shí),應(yīng)立即報(bào)告及時(shí)處理;實(shí)驗(yàn)完畢需用消毒液洗手,清水沖洗,方可離開實(shí)驗(yàn)室。然后我們讓學(xué)生談?wù)劄槭裁匆@樣做?通過討論,達(dá)成共識(shí):微生物實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)對(duì)象是病原菌,如不遵守實(shí)驗(yàn)規(guī)則,可能引起自己感染,或使自己成為病原菌的傳播媒介,造成他人感染;另外,空氣、桌面、地面、人口腔、手都細(xì)菌存在,如無菌觀念不強(qiáng),就會(huì)污染無菌物品,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。之后,我們把話題轉(zhuǎn)到護(hù)生今后工作的醫(yī)院:醫(yī)院是病原微生物較集中、抵抗力較低人群較密集地方,如果護(hù)生在今后工作中無菌觀念淡薄,無菌操作不嚴(yán)格如:換點(diǎn)滴瓶時(shí)瓶口不消毒、配藥時(shí)不戴口罩、處理完患者手不消毒,就會(huì)直接或間接地成為病原菌的傳播者和被感染者。此時(shí),再列舉臨床上由于未嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則導(dǎo)致的醫(yī)療護(hù)理事故,加深護(hù)生對(duì)無菌觀念的認(rèn)識(shí),使之產(chǎn)生深刻的共鳴。
三、強(qiáng)化無菌觀念
(一)教師認(rèn)真示教、帶教
教師是學(xué)生的榜樣,教師的一言一行都會(huì)對(duì)學(xué)生產(chǎn)生巨大的影響。因此教師無論示教還是帶教,都應(yīng)認(rèn)真地用自己的言行把無菌觀念滲透給學(xué)生以達(dá)到強(qiáng)化無菌觀念的目的。在學(xué)生實(shí)踐過程中,教師要不斷巡視,及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題并予以糾正。如革蘭染色時(shí),學(xué)生對(duì)教師示教過的無菌操作如接種環(huán)的滅菌、試管口的滅菌掌握較好,但有些學(xué)生在干燥時(shí)為節(jié)約時(shí)間,用嘴吹;還有的學(xué)生在染色時(shí)發(fā)現(xiàn)菌膜上有棉花毛,就毫不猶豫地用手拿下;沾有細(xì)菌的吸水紙隨意丟掉等。在總結(jié)時(shí),我們把這些問題提出來讓學(xué)生討論,使他們真正理解無菌操作不只是簡(jiǎn)單的模仿,它是無菌觀念在實(shí)驗(yàn)每一個(gè)細(xì)節(jié)上的體現(xiàn)。
(二)加強(qiáng)考核,強(qiáng)化記憶
考核是督促練習(xí)、強(qiáng)化記憶的主要方法,但單一的無菌操作考核方式不利于發(fā)現(xiàn)問題和糾正錯(cuò)誤,也不能真正反應(yīng)學(xué)生無菌觀念的強(qiáng)弱。所以我們把對(duì)學(xué)生無菌觀念和無菌技術(shù)的考核貫穿于全學(xué)期微生物實(shí)驗(yàn)課的始終,并采取了多種考核方法:
1、隨堂抽查:以小組為單位隨意抽查一名同學(xué)進(jìn)行考核,由該組同學(xué)進(jìn)行評(píng)價(jià)、打分,并請(qǐng)同學(xué)指出操作中哪些無菌操作規(guī)范,哪些不到位或沒做到。這樣,一人考核,大家受益。
2、隨堂考察:教師對(duì)學(xué)生的考察從學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室就開始了。如發(fā)現(xiàn)違反無菌操作原則的做法:把沒喝完的半瓶水帶入實(shí)驗(yàn)室、取過菌的接種環(huán)碰到自己的手卻無動(dòng)于衷、接種細(xì)菌時(shí)說話、實(shí)驗(yàn)過程中總用手摸自己的眼睛、鼻子、口及頭發(fā)等、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后手不消毒、清洗就想離開實(shí)驗(yàn)室等,我們會(huì)讓同學(xué)自己在實(shí)驗(yàn)考核薄上寫出錯(cuò)在哪里,這樣做的危害是什么?并給予一定的懲罰:如給同學(xué)配消毒液或把酒精燈的酒精裝好或在下一次實(shí)驗(yàn)課時(shí)把自己的錯(cuò)誤講給大家聽。但如果學(xué)生在操作中表現(xiàn)出很強(qiáng)的無菌觀念,我們會(huì)及時(shí)表?yè)P(yáng)并給予加分獎(jiǎng)勵(lì)。如有的學(xué)生在整理彎曲的接種環(huán)時(shí)先把接種環(huán)滅菌—整理—再滅菌—使用、值日生在打掃實(shí)驗(yàn)室時(shí)能提出用消毒液擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)或地面、手消毒后用清水沖洗完用肘部關(guān)掉水龍頭等。這種考核方法對(duì)強(qiáng)化學(xué)生的無菌觀念非常有益。
級(jí)別:CSCD期刊
榮譽(yù):Caj-cd規(guī)范獲獎(jiǎng)期刊
級(jí)別:部級(jí)期刊
榮譽(yù):中國(guó)優(yōu)秀期刊遴選數(shù)據(jù)庫(kù)
級(jí)別:統(tǒng)計(jì)源期刊
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